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          技術文章

          原代造就經歷分享

          時光:2017-08-02 閱讀次數:1267

          經歷分享:

          1.原代細胞鋪満瓶底後棄原液,PBS沖刷2次。

          2.參加0.25%Trypsin-0.02%EDTA,量籠罩瓶底便可,室溫感化,鏡下視察至組織塊四周的細胞回縮,平面感加強。

          3.棄去消化液,PBS輕漂一遍(目標是除去EDTA,它對軟弱的原代細胞很欠好)但不要用力搖擺,以避免部門消化稍過的細胞流掉。

          4.參加造就液奏樂,不要發生氣泡,對細胞有損。

          5.吸出2/3的懸液傳入新瓶。
          6.向原瓶中余下的1/3細胞懸液中補加2/3的新造就液,與未消化的組織塊持續造就。

          7. 24小時內新的細胞又從組織塊中爬出啦,等鋪滿後再如上所述做一次吧。
           

          注:

          1.只要當原代造就時組織塊較多時才如許做,不然得失相當。

          2.保存1/3的細胞是爲了讓余下的組織塊在細胞間感化下敏捷安康的發展。

          3.一瓶細胞以此法處置不要跨越3次。

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